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METODOLOGÍA PARA EL ANÁLISIS DE TANINOS

MÉTODO CUANTITATIVO (Adaptado del Método de la A.O.A.C.  Edición 14 -1984)

        MUESTRA: TARA EN VAINA, TARA EN POLVO DE DIVERSA GRANULOMETRIA

1. OBJETIVO : Determinar cuantitativamente el contenido (en porcentaje) de Taninos presentes en una muestra de Tara en Vaina y / o de Tara en polvo de diversa granulometría.

2. PRINCIPIO: Extracción de Taninos por medio acuoso y acción del calor, para luego colorearlos, titulándolos con una sustancia alcalina en presencia de indicador.

3. MATERIALES Y EQUIPOS:
         3.1.- Materiales de Vidrio:
              
. Erlemeyer de 100ml
              
. Embudo de vidrio
              
. Pipetas volumétricas de 20ml y 25 ml
              
. Bureta de 50 mi.
              
. Vasos de precipitados de 1000ml
         3.2.- Otros Materiales
:
              
. Papel filtro semilento
         3.3.- Equipos:
              
. Balanza analítica
              
. Cocinilla con control de temperatura
4. MÉTODO
         Volumétrico.
5. REACTlVOS:
     . Indicador: Índigo de Carmín.
    
. Titulante: permanganato de Potasio.

6. METODOLOGÍA:
     a. Pesar 2 gramos de la muestra
    b. Colocar la muestra en un erlemeyer (de 1000 ml) con 200 ml de agua, agitando para disolver la muestra.
    c. Colocar la preparación en la cocinilla hasta ebullición por 4 horas. Luego entibiar la muestra.
    d. Filtrar la muestra.
    e. Tomar 25 ml de la solución liquida y adicionar 20 ml de indicador, y 750 ml de agua destilada.
    f. Titular con permanganato de potasio hasta obtener color amarillo.
    g. Preparar un blanco con agua, adicionada de los reactivos en las mismas cantidades
7. CÁLCULOS:
         4,2 mg. de Taninos = 1ml (O.1N) de permanganato de potasio.

NOTA:
La única modificación que se realizó al método inicial es el tiempo de extracción.

AL PIE DE LETRA LA METODOLOGIA DICE: Indigo soln. .- Dissolve 6g Na Indigotin disulfonate in 500 mL H2O by heting; cool, add 50 mL H2SO4, dil. to 1 L, and filter.

PUEDEN CONSULTAR EL MANUAL: AOAC OFFICIAL METHODS OF ANALYSIS (1984), pag. 564# 30.018


EJEMPLO N° 1:

-Taninos:

Determinación cualitativa: Se pesaron 0,7 g de muestra y se colocó en un matraz. Se agregaron 200 ml de solución de ferricianuro de potasio 0,004 M y se agitó. Se agregaron luego 15 ml de la solución de cloruro férrico 0,008 M en ácido clorhídrico 0,008 M y se observaron los cambios de coloración teniendo en cuenta la siguiente tabla colorimétrica: Verde Claro: baja o nula cantidad de tanino; Verde Oscuro: contenido medio de tanino y Azul: alto contenido de tanino. (Price, et. al., 1978)

Determinación cuantitativa: por el método volumétrico de Lowenthal. Se hirvió durante 30 minutos una muestra de 5 g en 400 ml de agua, se transfirió a un matraz de 500 ml de agua y se enrasó. Se añadió a 10 ml de esta infusión, 25 ml de carmín índigo y 750 ml de agua.

Se dejó caer a partir de una bureta la disolución de KMnO4 (previamente titulado para determinar los ml de ácido oxálico 0,1 N equivalente a 1 ml de esta disolución) hasta que el color viró a verde claro y se continuó la titulación gota a gota hasta que la disolución adquirió un color amarillento brillante. Se designó a los ml de KMnO4 utilizados como a.

Se mezclaron luego 100 ml de la infusión con 50 ml de disolución de gelatina, 100 ml de la disolución ácida de CINa y 10 g de caolín en polvo, se agitó la mezcla durante unos minutos, se esperó a que sedimente y se decantó a través de un filtro. Se valoró con KMnO4 procediendo de la misma forma que en el paso anterior y se designó a los ml de KMnO4 utilizados como b. Se realizó la diferencia a - b que se designó a los ml de KMnO4 requeridos para oxidar taninos de la muestra. Un ml de ácido oxálico 0,1N equivale a 0,0042 g de tanino (ácido galotánico).

(Hart y Fisher, 1984).


EJEMPLO N° 2

Methods for Cider 'Tannin' Analysis

Two methods are given here - the Lowenthal Permanganate Titration 

1. The Lowenthal Permanganate Titration

This was the standard method used at the Long Ashton Research Station from 1903 until the Cider Section's closure in the 1980's. The method relies on the oxidation of phenolics by potassium permanganate solution in the presence of indigo carmine as a 'redox indicator' to show the end point.

The following solutions are required. Both are sensitive to light and oxidation and should be prepared freshly on the day of use:

Potassium permanganate solution (N/40 or 0.005M). This may be made up from freshly diluted stock solution obtained from a laboratory supply house (generally as N/10 or 0.02M). Alternatively, it may be made up as required by accurately dissolving 0.79 g of analytical grade potassium permanganate in 1 litre of water to give the 0.005M solution.

Indigo carmine indicator. This is made up as a 0.1% working solution by dissolving ca 1 g of indigo carmine in 1 litre of water to which 50 ml of concentrated sulphuric acid has been added (care!!).
 

Procedure

Samples are analysed by adding 1 ml sample and 5 ml indigo carmine to the 500 ml flask and adding ca 200 ml water (tap water is fine for this). Titrate this against the permanganate solution until the royal blue fades to a light green. Then titrate dropwise until the lime green changes to yellow. Record this value as X ml.

A blank titration using 5 ml of indigo carmine alone in 200 ml water should also be carried out. The blank value should be ca 1 ml and should be recorded as Y ml.

With a little practice the endpoint is consistent to within 0.1 ml. It is advisable to work against a white tile or paper background in well lit conditions to see the endpoint more clearly. It is also helpful if the burette which contains the permanganate has a white background for easier reading of the scale, since this solution is intensely coloured.
 

Calculation of results

Total Tannin (%) = (X-Y)/10 expressed as 'tannic acid' equivalents.

To convert to ppm (parts per million or mg/l) multiply the tannin percentage figure by 10,000.
 

References

J. Lowenthal  "Uber die Bestimmung des Gerbstoffs"   Z. Anal. Chem (1877) 16 33- 48

Burroughs LF and and Whiting GC  "Ann. Rept. Long Ashton Research Station for 1960" pp 140-143
 


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